曾經(jīng)常常聽(tīng)到有人問(wèn),這種細(xì)胞該用哪一種培養(yǎng)基呢?其實(shí)這個(gè)疑問(wèn)的答案可以很簡(jiǎn)單,也可以很復(fù)雜。若是這種細(xì)胞是購(gòu)自ATCC或其他的細(xì)胞庫(kù),那很簡(jiǎn)單,問(wèn)供貨商就行了。或參考有關(guān)的文獻(xiàn)。Invitrogen上有一個(gè)Cell Line Database的東西,也很好用。挑選你感興趣的細(xì)胞類型,它就會(huì)顯示相應(yīng)的培養(yǎng)基、血清和轉(zhuǎn)染試劑等,有時(shí)還有優(yōu)化好的轉(zhuǎn)染進(jìn)程,很方便。Sigma上也有一個(gè)Media Expert,包括培養(yǎng)基一切成分的功用描繪、運(yùn)用推介和參閱文獻(xiàn)等,它仍是一個(gè)解決問(wèn)題的能手,關(guān)于細(xì)胞培育中的常見(jiàn)疑問(wèn),如細(xì)胞貼壁欠好、培養(yǎng)基變色等,它都會(huì)列出相應(yīng)的緣由,并提供解決的辦法。
如果你是準(zhǔn)備樹(shù)立一種全新細(xì)胞的培育體系,并且找不到任何參閱,那你就得花時(shí)間自己實(shí)驗(yàn)了。在MEM中培育的細(xì)胞,很能夠在DMEM或M99中成長(zhǎng)。總之,MEM做貼壁細(xì)胞培育、RPMI 640做懸浮細(xì)胞培育是一個(gè)好的開(kāi)始。你也可以購(gòu)買多種培養(yǎng)基,然后花大概兩周的時(shí)間先做一個(gè)比較簡(jiǎn)單的細(xì)胞成長(zhǎng)試驗(yàn),然后從中挑選zui合適的。
以前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室都是用干粉培養(yǎng)基,但是制作的過(guò)程比較麻煩,需要溶解、調(diào)節(jié)pH值,過(guò)濾,在此過(guò)程中還會(huì)發(fā)生濃度誤差,而且有些實(shí)驗(yàn)室的水質(zhì)并不抱負(fù),所以培育的效果會(huì)有差別。如果使用液體培養(yǎng)基,這種人為的誤差會(huì)降低。可能你會(huì)覺(jué)得液體培養(yǎng)基比較貴,以前是這樣,但是現(xiàn)在不一樣了。HyClone和Invitrogen都在國(guó)內(nèi)建立了液體培養(yǎng)基的基地,和運(yùn)輸?shù)某杀敬蟠笙陆担匀缃竦膬r(jià)格也比較便宜,比干粉培育基貴不了多少,而且還幫你省了過(guò)濾器和時(shí)間。
血清富含成長(zhǎng)因子,可以推進(jìn)細(xì)胞的繁衍,富含的附著因子可推進(jìn)細(xì)胞的貼壁,一起還具有抗活性。血清也是礦物質(zhì)、脂類及激素的重要來(lái)源。zui常用的血清有小牛血清、重生牛血清、胎牛血清和馬血清等。牛血清是按照采血時(shí)間的早晚來(lái)分類的。采血時(shí)間越早,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)越豐富,所含抗體也越少,因而胎牛血清適合需求高的細(xì)胞系和克隆化培育。由于瘋牛病的原因,到目前為止,中國(guó)政府依然制止從北美洲、歐洲和日本等地區(qū)進(jìn)口牛血清,因此國(guó)內(nèi)市面上的牛血清大多來(lái)自澳洲、南美洲,或是國(guó)產(chǎn)的。