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?ELISA試劑盒使用原理

更新時間:2016-07-18 點擊量:865

?ELISA試劑盒使用原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠細胞間粘附分子 (ICAM-)水平。用純化的大鼠細胞間粘附分子 (ICAM-)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入細胞間粘附分子 (ICAM-),再與 HRP 標記的細胞間粘附分子 (ICAM-)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的細胞間粘附分子 (ICAM-)呈正相關。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),通過標準曲線計算樣品中大鼠細胞間粘附分子 (ICAM-)濃度。
?ELISA試劑盒使用原理是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的?ELISA試劑盒使用原理其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應的結果,使測定方法達到很高的敏感度。
 

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