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國產(chǎn)ELISA試劑盒標(biāo)本常用的反應(yīng)劑配制方法

更新時間:2017-04-27 點擊量:624

國產(chǎn)ELISA試劑盒檢查葡萄糖試劑 
配方一 本尼迪克(Benedict)溶液
() 在400毫升蒸餾水中溶解85克檸檬酸鈉和50克。
(2) 在50毫升加熱的蒸餾水中溶解8.5克硫酸銅。
把硫酸銅溶液緩緩倒入檸檬酸鈉-碳酸鈉溶液中,邊加邊攪拌,如果產(chǎn)生沉淀,要過濾。本尼迪克溶液配制后能使用(存放時間較久而產(chǎn)生沉淀是,取上層清液使用,不必重新配制)。
本尼迪克溶液用來測試食物、血液和尿中的葡萄糖,可測出0.5 ~0.20%的葡萄糖。這種溶液跟未知物同加熱時,如果未知物中有葡萄糖,會形成紅色的氧化亞銅沉淀物。
配方二 裴林(Fehling)溶液
()把34.5克硫酸銅溶于500毫升蒸餾水中。
(2)把25克氫氧化鉀(鈉)和73克酒石酸鉀鈉溶解在500毫升蒸餾水中。
上述兩種溶液應(yīng)分別保存。在檢測葡萄糖時,使他們等量的混合,加入待測物的試管內(nèi),加熱到沸騰。如果有葡萄糖,會形成紅色的氧化亞銅沉淀物。
2、檢查淀粉的試劑
魯哥氏(Lugol’s)溶液(碘液)
取6克溶于20毫升蒸餾水中,攪拌到溶解后,加入4克碘,等碘充分溶解,在加入80毫升蒸餾水,貯存在棕色試劑瓶內(nèi)。
碘液用來測試食物樣品或葉片中的淀粉,也用作染色劑,例如可染色鞭毛、纖毛和細(xì)胞核等。
3、檢查蛋白質(zhì)的試劑
配方一 米倫(Millon)試劑
在60毫升濃硝酸(比重.42)中溶解40克汞(水浴加溫可助溶),溶解后加入兩倍體積的蒸餾水稀釋,靜置澄清后,取它上層的清液備用。這種試劑可保存。
在待測物中加入少量米倫試劑,加熱,如果有蛋白質(zhì),會出現(xiàn)紅色。這種試劑不能用來測定尿中的蛋白質(zhì)。
配方二 雙縮尿試劑
分別配制0%氫氧化鈉溶液和%硫酸銅溶液。
在3毫升待測物中加入毫升0%氫氧化鈉溶液和滴%硫酸銅溶液。如果有蛋白質(zhì),會出現(xiàn)紫色反應(yīng)。
4、檢查脂肪的試劑
蘇丹Ⅲ(Ⅳ)酒精飽和溶液
取0.2克蘇丹Ⅲ(或蘇丹Ⅳ),放入純酒精中,加熱,使它充分溶解,成為飽和酒精溶液,過濾后密閉在試劑瓶內(nèi)保存?zhèn)溆谩?br />5、酸堿指示劑
配方一 試劑和試紙
試劑 取克,溶解在00毫升60%的酒精溶液里,裝在試劑瓶內(nèi)密閉保存。
酚態(tài)試紙 取克,溶解在00毫升95%酒精溶液里,加入00毫升蒸餾水。把綠紙條放入溶液中浸濕后,取出,放在無氨氣影響處晾干。
國產(chǎn)ELISA試劑盒酚泰試劑(試紙) pH值變色范圍8.2~0,在酸性和中性溶液中都無色,再堿性溶液中呈深紅色。
配方二 紅藍(lán)石蕊試紙
取市售石蕊克,放在80毫升0%酒精溶液中攪拌,使它溶解,然后過濾。把濾液分成兩份。份滴入稀磷酸或稀硫酸,到出現(xiàn)紅色為止。另份滴入稀氫氧化鈉溶液,到出現(xiàn)藍(lán)色為止。在上述制備的溶液中分別浸濕濾紙條,隨后取出濾紙條,放在蔽光處、無酸堿性氣體影響的地方晾干,即的紅、藍(lán)兩種石蕊試紙。
紅石蕊試紙在堿性溶液中變藍(lán),藍(lán)石蕊試紙在酸性溶液中變紅。
6、檢查二氧化碳的試劑
檢查二氧化碳的試劑,可用溴代藍(lán)溶液和石灰水。
配方一 溴代藍(lán)溶液
取0.克溴代藍(lán),溶解在00毫升蒸餾水里,滴入少量0.%氫氧化鉀溶液,使它成為弱堿性溶液而呈藍(lán)色。
溴代藍(lán)溶液pH值變色范圍是6.0(黃)~7.6(藍(lán))。待測物中如果有二氧化碳,會形成碳酸而使溶液變成黃色。
配方二 石灰水
在蒸餾水中加入生石灰(氧化鈣),變加邊攪拌,直到加入的生石灰不再溶解,呈飽和狀態(tài)時為止。在石灰水澄清后,傾出上層清液,用濾紙過濾,放在密閉瓶內(nèi)保存。
如果測定的物質(zhì)中有二氧化碳,會生成碳酸鈣,使石灰水變渾濁。
7、檢查細(xì)胞生活力的試劑
檢查細(xì)胞有無生活力,可用中性紅甲基藍(lán)試劑。國產(chǎn)ELISA試劑盒配制的方法是先分別配制%中性紅溶液和%甲基藍(lán)溶液,這兩種溶液各取份混合。該試劑使活細(xì)胞的液泡染上紅色,而使死細(xì)胞全部染成藍(lán)色。

 

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