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人elisa酶聯(lián)免疫試劑盒處理要求和注意事項(xiàng)

更新時(shí)間:2021-03-22 點(diǎn)擊量:590
    人elisa酶聯(lián)免疫試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),往預(yù)先包被人甘氨酰二肽氨基肽酶捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。
       用底物TMB顯色,在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色,顏色的深淺和樣品中的人甘氨酰二肽氨基肽酶呈正相關(guān),用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度,計(jì)算樣品濃度。
  一、樣本處理要求
  、血清:全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)一夜后于000g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
  2、血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 000g離心20分鐘。
  二、注意事項(xiàng)
  、嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
  2、洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體,溫育過(guò)程中不要讓微孔干燥掉。
  3、底物顯色液應(yīng)呈無(wú)色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。
  4、避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果,在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。
  5、不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會(huì)破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。
  人elisa酶聯(lián)免疫試劑盒以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù),可通過(guò)洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。

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