5x蛋白樣品上樣緩沖液  Western Blot 隨著免疫組織化學(xué)技術(shù)的發(fā)展和各種特異性抗體的出現(xiàn)，使許多疑難腫瘤得到了明確診斷。在常規(guī)腫瘤病理診斷中，有5%-0%的病例單靠常規(guī)染色難以作出明確的診斷，而借助免疫組化技術(shù)準確率可高達98%。

5x蛋白樣品上樣緩沖液  Western Blot 免疫組化染色流程
SP法

）脫蠟、水化；2）PBS洗2～3次各5分鐘；

3）3%H2O2（80%甲醇）滴加在TMA上，室溫靜置0分鐘；

4）PBS洗2～3次各5分鐘；

5）抗原修復(fù)；

6）PBS洗2～3次各5分鐘；

7）滴加正常山羊血清封閉液，室溫20分鐘。甩去多余液體。

8）滴加Ⅰ抗50μl，室溫靜置小時或者4℃過夜或者37℃小時。

9）4℃過夜后需在37℃復(fù)溫45分鐘。

0）PBS洗3次各5分鐘；

）滴加Ⅱ抗40～50μl，室溫靜置，或37℃小時；

2）II抗中可加入0.05%的tween-20。

3）PBS洗3次各5分鐘；

4）DAB顯色5～0分鐘，在顯微鏡下掌握染色程度；

5）PBS或自來水沖洗0分鐘；

6）蘇木精復(fù)染2分鐘，鹽酸酒精分化；

7）自來水沖洗0～5分鐘；

8）脫水、透明、封片、鏡檢。

5x蛋白樣品上樣緩沖液  Western Blot SABC法

）脫蠟、水化。

2）PBS洗兩次各5分鐘。

3）用蒸餾水或PBS配置新鮮的3%H2O2，室溫封閉5～0分鐘，蒸餾水洗3次。

4）抗原修復(fù)。

5）PBS洗5分鐘。

6）滴加正常山羊血清封閉液，室溫20分鐘。甩去多余液體。

7）滴加Ⅰ抗，室溫小時或者4℃過夜或者37℃小時（4℃過夜后在37℃復(fù)溫45分鐘）。

8）PBS洗三次每次2分鐘。

9）滴加化二抗，20℃～37℃20分鐘。

0）PBC洗3次每次2分鐘。

）滴加試劑SABC，20℃～37℃20分鐘。

2）PBS洗4次每次5分鐘。

3）DAB顯色：DAB顯色試劑盒或者自配顯色劑顯色（鏡下掌握顯色程度）。

4）蒸餾水洗。蘇木素復(fù)染2分鐘、鹽酸酒精分化。

脫水、透明、封片、鏡檢。

GOY-S3 中譜 預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標準（藍色，2-05kDa） 20次/00微升
GOY-S4 中譜 預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標準（藍色，2-05kDa） 50次/250微升

GOY-S5 中譜 預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標準（藍色，2-05kDa） 00次/500微升

GOY-S6 寬譜 預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標準（藍色，2-220kDa） 20次/00微升

GOY-S7 寬譜 預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標準（藍色，2-220kDa） 50次/250微升

GOY-S8 寬譜 預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標準（藍色，2-220kDa） 00次/500微升

GOY-S9 普通 蛋白質(zhì)分子量標準（低范圍，5-66kDa） 20次/00微升

GOY-S20 普通 蛋白質(zhì)分子量標準（高范圍，5-200kDa） 20次/00微升

GOY-S2 普通 蛋白質(zhì)分子量標準（寬范圍，6.5-200kDa） 20次/00微升

GOY-S22 5x蛋白樣品上樣緩沖液 Western Blot 5 ml

GOY-S23 30%單/雙丙烯酰胺預(yù)制膠溶液 Western Blot（9:） 00ml

GOY-S24 30%單/雙丙烯酰胺預(yù)制膠溶液 Western Blot（9:） 500ml

GOY-S25 30%單/雙丙烯酰胺預(yù)制膠溶液 Western Blot（29:） 00ml

GOY-S26 30%單/雙丙烯酰胺預(yù)制膠溶液 Western Blot（29:） 500ml

GOY-S27 40%單/雙丙烯酰胺預(yù)制膠溶液 Western Blot（9:） 00ml

GOY-S28 40%單/雙丙烯酰胺預(yù)制膠溶液 Western Blot（9:） 500ml