肝癌高表達(dá)基因抗體樣本的物種 應(yīng)選擇物種相同或有交叉反應(yīng)的抗體，抗體可能與不同物種的同種靶蛋白有交叉反應(yīng)，因其氨基酸序列同源性較高，如果樣本的種類未列入抗體說(shuō)明書(shū)上的交叉反應(yīng)種屬表中，并不意味著該抗體不適用于檢測(cè)該物種的蛋白，而只是表示該物種尚未用此抗體檢測(cè)驗(yàn)證過(guò)，應(yīng)通過(guò)序列比對(duì)的方法來(lái)預(yù)測(cè)交叉反應(yīng)，可應(yīng)用Expasy 和 NCBI BLAST 來(lái)進(jìn)行不同物種蛋白同源性比對(duì)。
肝癌高表達(dá)基因抗體一抗宿主物種的選擇一般說(shuō)來(lái)，在使用偶聯(lián)二抗結(jié)合無(wú)偶聯(lián)物的一抗時(shí)，一抗宿主動(dòng)物的物種選擇較為重要，對(duì)于免疫組化而言，盡可能選擇與樣本不同種系物種的一抗，從而避免二抗與樣本內(nèi)源性免疫球蛋白產(chǎn)生交叉反應(yīng)，例如：檢測(cè)小鼠樣本蛋白，則不應(yīng)選擇小鼠或大鼠源的一抗，選兔源的一抗，則二抗則可選擇偶聯(lián)了檢測(cè)分子（酶、熒光素、等）的抗兔IgG。
如果選擇有偶聯(lián)物的一抗則不適用上述情況，除免疫組化外的其它對(duì)不含內(nèi)源性免疫球蛋白樣本的檢測(cè)方法，則抗體宿主物種的影響不大，如對(duì)不含IgG 的細(xì)胞裂解物樣本的western blotting檢測(cè)，盡管如此，含有血清的組織裂解物和組織培養(yǎng)上清中含有免疫球蛋白，還原變性樣本中含IgG，在western blot 檢測(cè)中則結(jié)合出現(xiàn)IgG 分子50 and 25 kDa 的重鏈和輕鏈條帶。
二抗的選擇 二抗應(yīng)選用與使用的一抗相同的物種來(lái)源，例如：如果你的一抗是小鼠的單克隆抗體，二抗則選抗小鼠的二抗anti-mouse secondary。建議檢查二抗說(shuō)明書(shū)確保該抗體適用于你的檢測(cè)應(yīng)用， 二抗一般連接熒光素FITC 或發(fā)光團(tuán)。
上海谷研生物科技有限公司特殊抗體的保存條件：
. 酶聯(lián)抗體：永遠(yuǎn)保存在4 度，避免凍起來(lái)。否則會(huì)導(dǎo)致酶活性的下降或者喪失
2. 偶聯(lián)抗體：所有偶聯(lián)抗體都是在棕色管中或使用錫箔紙避光保存。尤其是熒光抗體，對(duì)
光極為敏感，因此在所有的實(shí)驗(yàn)階段也是要避光操作的！
3. IgG3 的同型對(duì)照：永遠(yuǎn)保存在4 度，避免凍起來(lái)。因?yàn)槿绻霈F(xiàn)凍融過(guò)程，該抗體非常
容易形成多聚體無(wú)論是保存還是運(yùn)輸，避免反復(fù)凍融！
反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致抗體變性，導(dǎo)致多聚體形成，從而降低抗體的結(jié)合能力！
其它相關(guān)信息：
Transthyretin （TTR/prealbumin） 轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白抗體
TRBF/TRF （omeric repeat binding factor ） 端粒體復(fù)制結(jié)合因子抗體
TRF（Transferrin） 抗轉(zhuǎn)鐵蛋白抗體
TRF2（omere repeat binding factor 2） 端粒結(jié)合蛋白2抗體
omerase Binding Protein，P23 端粒酶結(jié)合蛋白P23抗體
TRIM32（tripartite motif protein 32） TRIM32抗體
pig IgM （親和純化）豬IgM
Mink IgG 水貂IgG （親和純化）
Mink IgG 水貂IgG （親和純化）
Rabbit IgG 兔IgG（親和層析純化）
Rabbit IgG 兔IgG（親和層析純化）
TrK A （Tyrosine kinase,TrkA） 激酶A抗體（神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體的一種）
TrK A （Tyrosine kinase,TrkA） 激酶A抗體（神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體的一種）
TrKA.B.C/TrK（Tyrosine kinase,TrkA.B.C） 激酶A.B.C抗體
Trk B（Tyrosine kinase,Pyk2） 激酶B抗體（神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體的一種）
關(guān)于加入甘油保存：有些人會(huì)加50%的甘油到抗體中來(lái)避免反復(fù)凍融，甘油在-20 度 會(huì)降低冰點(diǎn)。這對(duì)很多抗體可能是可行的。但是abcam 僅對(duì)非常小的一部分抗體檢測(cè)過(guò)其在這種條件下的穩(wěn)定性；而abcam 只對(duì)按照條件保存的抗體提供質(zhì)量保證！加入甘油的溶液不建議在-80 度保存，因?yàn)檫@已經(jīng)超過(guò)了甘油的冰點(diǎn)。如果您要加入甘油來(lái)保存抗體的話，請(qǐng)謹(jǐn)慎注意無(wú)菌操作，避免污染！
關(guān)于蛋白保護(hù)劑：
蛋白在高濃度時(shí)更不容易降解（ mg/ml 或者更高），這就是為什么在抗體中加入BSA 之類作為穩(wěn)定劑的原因了；另一方面，加入的蛋白也可以減少抗體由于管壁吸附所造成的損失。但是如果抗體要用來(lái)標(biāo)記的話，則不能加入蛋白穩(wěn)定劑，因?yàn)檫@些穩(wěn)定劑會(huì)和抗體一起競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合標(biāo)記物。