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大鼠腎小管上皮細(xì)胞

【概要描述】大鼠腎小管上皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:NCI-H1623非小細(xì)胞肺癌人骨骼肌細(xì)胞人韌帶成纖維細(xì)胞人類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜成纖維細(xì)胞人脊柱炎髖關(guān)節(jié)滑膜成纖維細(xì)胞人關(guān)節(jié)滑膜成纖維細(xì)胞人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞人髓核細(xì)胞人黑色瘤細(xì)胞人尾椎腫瘤細(xì)胞

型號: 點擊量:595 廠商性質(zhì):代理商 更新日期:2025-03-19
產(chǎn)品詳情

本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實驗,不做其他科學(xué)實驗外的使用!
大鼠腎小管上皮細(xì)胞

產(chǎn)品名稱

大鼠腎小管上皮細(xì)胞

組織來源

腎組織

規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

包裝

T25培養(yǎng)瓶

貨號

GOY-01X0920

細(xì)胞形態(tài)

上皮細(xì)胞樣


大鼠腎小管上皮細(xì)胞

大鼠腎小管上皮分離自腎組織;腎臟是機(jī)體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物,同時經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì),如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、碳suan氫鈉等,以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護(hù)酸堿平衡。腎臟同時還有內(nèi)分泌功能,生成腎素、促紅細(xì)胞生成素、活性維生D3、前列腺素、激肽等,又為機(jī)體部分內(nèi)分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能,保證了機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,使新陳代謝得以正常進(jìn)行。腎小管是機(jī)體腎臟器官上與腎小囊壁層相連的一條細(xì)長上皮性小管,具有重吸收(reabsorption)和排泌作用。腎小管按不同的形態(tài)結(jié)構(gòu)、分布位置和功能分成近端小管、髓袢和遠(yuǎn)端小管三部分;近端小管可分為直部和曲部,曲部也稱為近曲小管,位于皮質(zhì)迷路內(nèi),于腎小體附近高度蟠曲;遠(yuǎn)端小管曲部也稱為遠(yuǎn)曲小管,位于皮質(zhì)迷路內(nèi)。腎小管上皮細(xì)胞是腎小管外面的一層細(xì)胞,腎小管上皮細(xì)胞的分離、培養(yǎng)是研究腎臟疾病的一項重要技術(shù),目前該分離方法有酶分離法、化學(xué)分離法篩網(wǎng)分離法、顯微解剖分離法、流式細(xì)胞儀分離法等。腎小管上皮細(xì)胞主要功能:①腎小管上皮細(xì)胞重吸收原尿中幾乎全部的葡萄糖和氨基酸;②排泌非營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入終尿;③細(xì)胞能分泌炎癥介質(zhì)如細(xì)胞因子和趨化因子,通過產(chǎn)生IL-8或直接趨化白細(xì)胞參與急性炎癥反應(yīng);④移植腎炎癥和新月體腎炎中PTEpiC表達(dá)IL-2R和MHC-Ⅱ類抗原,這說明腎小管上皮細(xì)胞參與腎免疫損傷的發(fā)生。隨著對腎間質(zhì)纖維化機(jī)制研究的日漸加深,腎小管上皮細(xì)胞(RTECs)在其中的作用日益被人們重視。因此,提供良好的腎小管上皮細(xì)胞模型,在腎小管間質(zhì)疾病的發(fā)病機(jī)制和治療藥物篩選的研究中是非常重要的。
方法簡介:

公司實驗室分離的大鼠腎小管上皮采用先機(jī)械研磨過不銹鋼網(wǎng)篩分離得到腎小管、后用膠原酶消化,結(jié)合上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:

公司實驗室分離的大鼠腎小管上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

 


大鼠腎小管上皮細(xì)胞

大鼠腎小管上皮細(xì)胞

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)

培養(yǎng)基 FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

大鼠腎小管上皮細(xì)胞

準(zhǔn)備工作

1. 實驗器材準(zhǔn)備:準(zhǔn)備無菌的培養(yǎng)皿、培養(yǎng)瓶、移液管、離心管、手術(shù)器械等,并進(jìn)行高壓滅菌或其他合適的消毒處理。

2. 試劑準(zhǔn)備:配制或購買合適的培養(yǎng)基、消化酶(如、膠原酶等)、胎牛血清、雙抗等試劑,確保其無菌且在有效期內(nèi)。

3. 實驗動物或組織來源準(zhǔn)備:根據(jù)實驗需求,選擇合適的動物并進(jìn)行相應(yīng)的麻醉或處死,獲取所需組織;或從已有的組織樣本庫中獲取組織。

取材與處理

1. 取材:在無菌條件下,迅速取出目標(biāo)組織,盡量減少對組織的損傷,并去除多余的脂肪、結(jié)締組織等非目的組織。

2. 清洗:將取出的組織用預(yù)冷的無菌PBS沖洗數(shù)次,以去除血液和雜質(zhì)。

3. 剪切:將組織剪成約1 - 2mm3的小塊,以便后續(xù)消化。

細(xì)胞分離

1. 消化:將剪碎的組織塊放入含有適量消化酶的離心管中,在37℃恒溫?fù)u床或培養(yǎng)箱中消化一段時間。期間可輕輕搖晃離心管,使消化更均勻。

2. 終止消化:當(dāng)組織塊大部分被消化成單細(xì)胞懸液或小細(xì)胞團(tuán)時,加入含血清的培養(yǎng)基終止消化。

3. 過濾與離心:用細(xì)胞篩過濾細(xì)胞懸液,去除未消化的組織碎片,然后將濾液以適當(dāng)?shù)霓D(zhuǎn)速離心,收集細(xì)胞沉淀。

細(xì)胞觀察與檢測

1. 日常觀察:每天用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞的形態(tài)、生長狀態(tài)、密度等,記錄細(xì)胞的變化情況,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞污染或異常,及時采取相應(yīng)措施。
2. 細(xì)胞計數(shù)與活力檢測:在需要時,可采用臺盼藍(lán)染色等方法對細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)和活力檢測,以了解細(xì)胞的生長情況和健康狀態(tài)。

大鼠腎小管上皮細(xì)胞

大鼠腎小管上皮細(xì)胞

小鼠雜交瘤細(xì)胞;HPS1

小鼠雜交瘤細(xì)胞;HRP

小鼠雜交瘤細(xì)胞;HumanIgM

(Rac)-Brassinazole

小鼠雜交瘤細(xì)胞;HumanIgG

2-溴-4'-羥基苯乙酮

小鼠雜交瘤細(xì)胞;HumanP16

4-氨基-5-溴-2-醇

小鼠雜交瘤細(xì)胞;IKBKB

3-Bromo-7-nitroindazole

小鼠雜交瘤細(xì)胞;HPRT

8-溴鳥苷

小鼠雜交瘤細(xì)胞;IFN-gamma

(R,R)-(-)-2,3-丁二醇

人膽囊癌細(xì)胞GBC-SD(STR鑒定正確)

乙烯基乙

小鼠雜交瘤細(xì)胞;IKBKE

5-[Boc(methyl)amino]pentanal

小鼠雜交瘤細(xì)胞;IL-11

4,4'-雙(4-氨苯氧基)聯(lián)

小鼠雜交瘤細(xì)胞;IL-16

(Rac)-Benpyrine

小鼠雜交瘤細(xì)胞;IL-10

8-Bromo-cAMP sodium salt

小鼠淋巴瘤細(xì)胞;IL-6

大鼠腎小管上皮細(xì)胞3BDO

小鼠雜交瘤細(xì)胞;InfluenzaAvirusNucleoprotein

1-BCP

大鼠脾臟NK細(xì)胞分離液試劑盒

8-Azaadenosine


大鼠腎小管上皮細(xì)胞

一、取材與分離

1. 快速操作

- 組織取材后需立即處理,避免長時間暴露于室溫或非營養(yǎng)環(huán)境。

- 使用無菌 PBS 或生理鹽水沖洗組織,去除血液、雜質(zhì)。

2. 消化酶選擇

- 根據(jù)組織類型選擇消化酶,避免過度消化導(dǎo)致細(xì)胞損傷。

- 消化時間需嚴(yán)格控制(通常 10-30 分鐘),可通過顯微鏡觀察細(xì)胞解離狀態(tài)。

二、培養(yǎng)條件優(yōu)化

1. 培養(yǎng)基選擇

- 使用含血清或特定生長因子的培養(yǎng)基(如 DMEM、RPMI 1640 等),部分細(xì)胞需添加胰島素、EGF 等。

- 避免頻繁更換培養(yǎng)基品牌或批次,減少細(xì)胞適應(yīng)壓力。

2. 貼壁與傳代

- 原代細(xì)胞貼壁能力較弱,可能需要包被培養(yǎng)皿(如膠原蛋白、多聚賴氨酸)。

- 傳代時密度建議控制在 70%-80%,過度匯合會導(dǎo)致接觸抑制和分化。

三、污染控制

1. 無菌操作

- 全程在超凈臺操作,使用一次性耗材,避免交叉污染。

- 培養(yǎng)基中可添加雙抗,但長期使用可能影響細(xì)胞活性。

2. 支原體檢測

- 定期檢測支原體污染(如 PCR 法),污染后需及時丟棄細(xì)胞。

四、狀態(tài)監(jiān)控

1. 日常觀察

- 每天檢查細(xì)胞形態(tài)、密度及培養(yǎng)基顏色,及時更換培養(yǎng)基(通常每 2-3 天換液一次)。

- 異常形態(tài)(如細(xì)胞變圓、碎片增多)可能提示污染或營養(yǎng)不足。

2. 傳代與凍存

- 原代細(xì)胞分裂次數(shù)有限(一般 5-10 代),需及時凍存早期代次細(xì)胞。

- 凍存液建議使用 DMSO+血清(或?qū)S脙龃媾囵B(yǎng)基),梯度降溫后液氮保存。




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