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A-673(橫紋肌瘤細(xì)胞) 具體操作
取出凍存管: 根據(jù)細(xì)胞凍存記錄按標(biāo)簽找到所需細(xì)胞的編號(hào)。
從液氮罐中取出細(xì)胞盒,取出所需的細(xì)胞,同時(shí)核對(duì)管外的編號(hào)。
初學(xué)者易犯錯(cuò)誤:水浴鍋未預(yù)熱或者未預(yù)熱到37℃。
水浴鍋內(nèi)凍存管太多,導(dǎo)致傳熱不佳,使融化時(shí)間延長(zhǎng)。
離心前忘記平衡,導(dǎo)致離心機(jī)損壞和細(xì)胞丟失。
一次復(fù)蘇細(xì)胞過(guò)多,忘記更換吸頭和吸管,導(dǎo)致細(xì)胞交叉污染。
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:將水浴鍋預(yù)熱至37℃
A-673(橫紋肌瘤細(xì)胞) 用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺(tái)臺(tái)面。
在超凈工作臺(tái)中按次序擺放好消過(guò)毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶 等。
迅速解凍:
迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動(dòng),使管中的液體迅速融化。
.約-2min后
凍存管內(nèi)液體*溶解,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,再拿入超凈臺(tái)內(nèi)。
平衡離心:用架盤天平平衡后,放入離心機(jī)中3000r/min 離心3min
制備細(xì)胞懸液:吸棄上清液。
向離心管內(nèi)加入0ml培養(yǎng)液,吹打制成細(xì)胞懸液。
活化與細(xì)胞復(fù)蘇 收到細(xì)胞株包裹時(shí), 請(qǐng)檢查細(xì)胞株冷凍管是否有解凍情形, 若有請(qǐng)立即通知。細(xì)胞株請(qǐng)盡速開始培養(yǎng), 或立即冷凍保存(置于–70 °C, 隔夜后, 移到liq N2)。
細(xì)胞復(fù)蘇的原則-快速融化:必須將凍存在-96℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃,使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶,對(duì)細(xì)胞造成損害。
細(xì)胞計(jì)數(shù):細(xì)胞濃度以5×05/ml為宜。
培養(yǎng)細(xì)胞將復(fù)合細(xì)胞計(jì)數(shù)要求的細(xì)胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)2-4小時(shí)(或者24-48小時(shí))后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),換液的時(shí)間由細(xì)胞情況而定。
公司其他銷量大產(chǎn)品信息: 0354 L-亮氨醇/S-(+)--氨基-4-甲基--戊醇/L-Leucinol BR,97%,具刺激性 7533-40-6 7533-40-6L-亮氨醇 L-亮氨醇 L-Leucinol
0355 L- 丙氨醇/(S)-- 丙氨醇/L--氨基-3- 基--丙醇/L-Phenylalaninol BR,98% 克 38-95-4 38-95-4L- 丙氨醇 L- 丙氨醇 L-Phenylalaninol 0356 L- 丙氨醇/(S)-- 丙氨醇/L--氨基-3- 基--丙醇/L-Phenylalaninol BR,98%,腐蝕品 克 567-64- 567-64-L- 丙氨醇 L- 丙氨醇 L-Phenylalaninol
0357 D- 甘氨醇/R- 甘氨醇/右旋 甘氨醇/- 甘氨suan"/(R)-(-)-- 氨基乙醇/D-Phenylglycinol BR,98% 5663-80-0 5663-80-0D- 甘氨醇 D- 甘氨醇 D-Phenylglycinol
0358 D-脯氨醇/(R)-(-)--吡咯烷甲醇/D-Prolinol BR,98%,具刺激性 克 6883-3-3 6883-3-3D-脯氨醇 D-脯氨醇 D-Prolinol
0359 L-蛋氨醇/L-(-)-蛋氨醇/(S)--氨基-4-(甲硫基)--丁醇/L-Methionionl BR,98%,具刺激性 克 899-37-8 899-37-8L-蛋氨醇 L-蛋氨醇 L-Methionionl
0360 L-蘇氨醇/H-蘇氨醇/L-Threoninol BR,97%,具刺激性 克 38-5- 38-5-L-蘇氨醇 L-蘇氨醇 L-Threoninol
036 L-纈氨醇/(S)--氨基-3-甲基--丁醇/L-Valinol BR,97% 克 06-48-4 06-48-4L-纈氨醇 L-纈氨醇 L-Valinol
036 L-異亮氨醇/(S,3S)--氨基-3-甲基--戊醇/L-Isoleucinol BR,97%,腐蝕品 克 469-5- 469-5-L-異亮氨醇 L-異亮氨醇 L-Isoleucinol
0363 D-色氨醇/D-Tryptophanol BR,97% 50毫克 5485-5-6 5485-5-6D-色氨醇 D-色氨醇 D-Tryptophanol
克
0370 BOC-L-天冬酰胺/N-叔丁氧羰基-L-天冬酰胺/Boc-L-asparagine BR,98.5% 0克 7536-55- 7536-55-BOC-L-天冬酰胺 BOC-L-天冬酰胺 Boc-L-asparagine
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