使用方法:
一、樣品 RNA 的制備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意：可以選用本公司的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二：RT（逆轉錄）反應合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反應體系（20 μL 體系）
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴格按順序加入 6μL RT Buffer（含 dNTP）和 2μL MMLV 逆轉錄酶（含 RI），
反應終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應，然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用，丌需要純化。
?產品名稱：登革熱病毒型(DFV-I)核酸檢測試劑盒品牌
規格：48T/盒
類別:熒光-PCR法
運輸：低溫、避光、快遞免費送貨上門。
用途：生化實驗，合成實驗等試驗。
運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個月。
自備試劑：樣品 RNA。

?

性能指標：點擊了解更多熒光-PCR法。
.試劑盒檢測特異性為00%
2. 檢測試劑盒重現性為00%
3. 靈敏度可達到03/ml
4. 有效期為6個月
注意事項：
①加入試劑的順序應*，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 5-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至0kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數第二個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.～umol或0～00pmol，以低引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
?3-溴-5-氟苯　250mL　Denaturing Lysis Buffer 　常溫保存

4-羧苯硼頻那醇酯　500mL　Denaturing Solution 　常溫保存

叔丁基二基氯硅烷　50mL　Denhardt’s Solution,00X 　常溫保存

3-氨基吡唑　25mL　Denhardt’s Solution,50X　常溫保存

2-氨基6-基啶　250mL　Dextrose Gelatin Veronal DGV 　常溫保存

乙烯基溴化鎂　250mL　Dialysis Tubing Wash Buffer，5X　常溫保存

,3-丙二羧二甲酯　250mL　Diluting Solution，2X 　常溫保存

4-溴-2,6-二氟苯甲　00mL　DIPSO Buffer,0.2M,pH7.0 　常溫保存

5-溴-7-氮雜吲哚　00mL　DIPSO Buffer,0.2M,pH7.4 　常溫保存

5-溴-2-嘧啶　00mL　DIPSO Buffer,0.2M,pH8.0 　常溫保存

2,3-二氟苯乙酮　00mL　DIPSO Buffer,0.2M,pH8.5 　常溫保存

2-基-6-氯啶　00mL　Dulbecco's Phosphate Buffered Saline，Ca-Mg free 　常溫保存

N-4-BOC-2-哌乙 基 酯　250ml　E. Coli Lysis Buffer 　常溫保存

2-氯-6-氨基嘌呤　250mL　E. Coli Lysis Buffer-II,pH7.4 　常溫保存

2-基-4-氨基啶　25mL　E.coli Sample Buffer 　常溫保存
登革熱病毒型(DFV-I)核酸檢測試劑盒品牌HIS(Histamine)   人組胺　CAS:　4097-22-7　  　  規格：　25mg

Resistin    人抵抗素　CAS:　84-7-3　  　  規格：　25mg

ALP-B(Bone-specific Alkphase B)   人骨特異性堿性磷酶B　CAS:　-42-2　  　  規格：　3ml

OT/BGP(Osteocalcin/Bone gla protein)   人骨鈣素/骨谷氨蛋白　CAS:　642-54-2　  　  規格：　200mg

sRANKL(soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand)   人可溶性核因子κB受體活化因子配基　CAS:　-46-6　  　  規格：　0．5ml

,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3(,25-dihydroxyvitamin D3)   人,25二羥基3　CAS:　84-66-2　  　  規格：　200mg

histon-H2b   人組蛋白H2b　CAS:　34-80-5　  　  規格：　200mg

OPG(Osteoprotegerin)   人骨保護素　CAS:　0-40-7　  　  規格：　ml

BMPR- II (Bone morphogenetic protein receptor II )   人骨成型蛋白受體Ⅱ　CAS:　56-53-　  　  規格：　200mg

BMPR-A(Bone morphogenetic protein receptor A)   人骨成型蛋白受體A　CAS:　34-62-3　  　  規格：　3g

BMP-4(Bone morphogenetic protein 4) ELISA Ki  人骨成型蛋白4　CAS:　33564-3-7　  　  規格：　200mg

BMP-2(Bone morphogenetic protein 2)   人骨成型蛋白2　CAS:　22494-42-4　  　  規格：　200mg

cAMP(cyclic adenosine monophosphate)   人　CAS:　803-42-3　  　  規格：　3g

MASP(mannan binding lectin associated serine protease)   人甘露聚糖結合凝集素相關絲氨蛋白酶　CAS:　7-63-6　  　  規格：　200mg

CDK-7(Cyclin-dependent kinase 7)   人周期素依賴性激酶7　CAS:　9408-84-5　  　  規格：　25mg