使用方法:
一、樣品 RNA 的制備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意：可以選用本公司的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二：RT（逆轉(zhuǎn)錄）反應(yīng)合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系（20 μL 體系）
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴(yán)格按順序加入 6μL RT Buffer（含 dNTP）和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），
反應(yīng)終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應(yīng)。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應(yīng)，然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用，丌需要純化。
產(chǎn)品名稱：貓瘟病毒(FPV)核酸檢測試劑盒品牌
規(guī)格：48T/盒
類別:熒光-PCR法
運(yùn)輸：低溫、避光、快遞免費(fèi)送貨上門。
用途：生化實驗，合成實驗等試驗。
運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個月。
自備試劑：樣品 RNA。

性能指標(biāo)：點擊了解更多熒光-PCR法。
.試劑盒檢測特異性為00%
2. 檢測試劑盒重現(xiàn)性為00%
3. 靈敏度可達(dá)到03/ml
4. 有效期為6個月
注意事項：
①加入試劑的順序應(yīng)*，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 5-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至0kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.～umol或0～00pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
Fmoc-2-氨基異丁　瓶　Chang liver　低溫運(yùn)輸和保存

2-苯基吲哚　瓶　CHL　低溫運(yùn)輸和保存

吉西他濱　瓶　CHO-K　低溫運(yùn)輸和保存

苯并噻吩　瓶　CHO　低溫運(yùn)輸和保存

5-硝基水楊　瓶　CL87/CCL87　低溫運(yùn)輸和保存

3,4,5-*氧苯乙　瓶　CNE-2Z　低溫運(yùn)輸和保存

[,'-雙(二苯基膦)二茂鐵]二鈀二氯甲烷絡(luò)合物　瓶　CNE　低溫運(yùn)輸和保存

2-氟甲苯　瓶　COC　低溫運(yùn)輸和保存

2,3-二基酚　瓶　COLO205　低溫運(yùn)輸和保存

BOC-D-絲氨酯　瓶　COLO320/DM　低溫運(yùn)輸和保存

2,5-二羥基甲苯　瓶　COS- [COS]　低溫運(yùn)輸和保存

3,4-二氯甲苯　瓶　COS-7 [COS7]　低溫運(yùn)輸和保存

2,5-二基胺　瓶　COS-7 SV40　低溫運(yùn)輸和保存

紅色KB/5-氯-2-基胺　瓶　CRFK　低溫運(yùn)輸和保存

2-氯-5-基胺　瓶　CRT　低溫運(yùn)輸和保存
貓瘟病毒(FPV)核酸檢測試劑盒品牌Mouse pituitary adenylate cyclase activating polypeptide,PACAP    小鼠垂體腺苷環(huán)化酶激活肽  進(jìn)口/國產(chǎn)常溫，避光  規(guī)格:00mg

lymphocyte factor   人淋巴細(xì)胞因子  進(jìn)口/國產(chǎn)常溫，避光  規(guī)格:00mg

TGF Beta2 (Rabbit transforming growth factor Beta2)   兔轉(zhuǎn)化生長因子β2  進(jìn)口/國產(chǎn)常溫，避光  規(guī)格:00mg

NOS (Rabbit nitric oxide synthase)   兔一氧化氮合成酶  進(jìn)口/國產(chǎn)常溫，避光  規(guī)格:00mg

Plant Vitamin A,VA    植物  進(jìn)口/國產(chǎn)常溫，避光  規(guī)格:00mg

Mouse Angiotensin converting enzyme,ACE   小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶  進(jìn)口/國產(chǎn)常溫，避光  規(guī)格:00mg

TARC/CCL7(thymus activation regulated chemokine)   人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子  進(jìn)口/國產(chǎn)常溫，避光  規(guī)格:00mg

PGR    大鼠孕酮受體  進(jìn)口/國產(chǎn)常溫，避光  規(guī)格:00mg

Mouse angiotension II ,ANG- II   小鼠血管緊張素Ⅱ  進(jìn)口/國產(chǎn)常溫，避光  規(guī)格:00mg

Plant Vitamin E,VE E   植物  進(jìn)口/國產(chǎn)常溫，避光  規(guī)格:00mg

eNOS (Rabbit Endothelial nitric oxide synthase)   兔內(nèi)皮型一氧化氮合成酶  進(jìn)口/國產(chǎn)2-8℃，避光  規(guī)格:300mg

NCAM-L/CD7(Neural cell adhesion molecule ligand )   人神經(jīng)細(xì)胞粘附分子配體  進(jìn)口/國產(chǎn)常溫，避光  規(guī)格:00mg

ACE II   大鼠血管緊張素Ⅱ轉(zhuǎn)化酶  進(jìn)口/國產(chǎn)常溫，避光  規(guī)格:00mg

ACE I   大鼠血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶  進(jìn)口/國產(chǎn)常溫，避光  規(guī)格:00mg

PLAUR/uPAR (Rabbit Urokinase-type Plasminogen Activator Receptor)   兔型纖溶酶原激活物受體  進(jìn)口/國產(chǎn)常溫，避光  規(guī)格:50mg