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野兔熱(Tul)核酸檢測(cè)試劑盒對(duì)外源性干擾因素進(jìn)行簡(jiǎn)要說明

更新時(shí)間:2021-01-07 點(diǎn)擊量:828

野兔熱(Tul)核酸檢測(cè)試劑盒對(duì)外源性干擾因素進(jìn)行簡(jiǎn)要說明

()標(biāo)本溶血 要注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán),其具有類過氧化物的活性,因此,在以辣根過氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)為標(biāo)記酶的ELISA測(cè)定中,如果血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過程中吸附于固相,從而與后面加入的底物反應(yīng)顯色。

(2)標(biāo)本被細(xì)菌污染 標(biāo)本的采集及血清分離要注意盡量避免細(xì)菌污染。細(xì)菌菌體中除可能含有內(nèi)源酶對(duì)測(cè)定產(chǎn)生非特異性干擾外,還可能對(duì)抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用。另外標(biāo)本在保存中出現(xiàn)渾濁或絮狀物時(shí),應(yīng)離心沉淀后取上清檢測(cè)。

(3)標(biāo)本貯存時(shí)間過長(zhǎng) 標(biāo)本在低溫下保存時(shí)間過長(zhǎng),IgG可聚合成多聚體,在間接法ELISA測(cè)定中會(huì)導(dǎo)致本底加深、甚至出現(xiàn)假陽性結(jié)果。通常情況下血清標(biāo)本可在2~8℃下保存l周,冷凍保存時(shí)間會(huì)更長(zhǎng),但對(duì)于抗體或抗原含量低的標(biāo)本而言,則可能會(huì)因抗體掉價(jià)、抗原分解而出現(xiàn)假陰性結(jié)果。

(4)ELISA試劑盒標(biāo)本凝固不全 血液通常在采集后半小時(shí)后開始凝固,8~24h*凝固。如果在血液未凝固時(shí)即離心分離血清,則可因纖維蛋白原非特異吸附于微孔而造成假陽性結(jié)果。為了縮短標(biāo)本處理時(shí)間,可以在離心前將血液標(biāo)本置于溫箱中溫育或者采用帶分離膠的或于中加入適當(dāng)?shù)拇倌齽┮约铀傺宓姆蛛x。

(5)冷凍保存標(biāo)本避免反復(fù)凍融 標(biāo)本的反復(fù)凍融會(huì)因其所產(chǎn)生的機(jī)械剪切力對(duì)標(biāo)本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用,使抗體效價(jià)跌落從而引起假陰性結(jié)果,ELISA試劑盒所以測(cè)抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測(cè),宜少量分裝凍存。此外,標(biāo)本在凍存時(shí)會(huì)因蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,因此重新融解的標(biāo)本必須混勻,但不要進(jìn)行劇烈振蕩,反復(fù)顛倒即可。 

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