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小鼠食管平滑肌細(xì)胞

【概要描述】小鼠食管平滑肌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:HT29/219結(jié)腸癌Jurkat,CloneE6-1細(xì)胞JVM-2細(xì)胞KALS-1細(xì)胞Kasumi-3細(xì)胞KE-39細(xì)胞Kelly細(xì)胞KHM-1B細(xì)胞KLM-1細(xì)胞KM12細(xì)胞

型號(hào): 點(diǎn)擊量:616 廠(chǎng)商性質(zhì):代理商 更新日期:2025-03-20
產(chǎn)品詳情

本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn),不做其他科學(xué)實(shí)驗(yàn)外的使用!
小鼠食管平滑肌細(xì)胞

產(chǎn)品名稱(chēng)

小鼠食管平滑肌細(xì)胞

組織來(lái)源

食管組織

規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

包裝

T25培養(yǎng)瓶

貨號(hào)

GOY-01X0794

細(xì)胞形態(tài)

成纖維細(xì)胞樣


小鼠食管平滑肌細(xì)胞

小鼠食管平滑肌分離自食管組織;食管可分為頸段、胸段和腹段,脊椎動(dòng)物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端,胸段位于左、右肺之間的縱膈內(nèi),胸段通過(guò)膈孔與腹腔內(nèi)腹相連,腹段很短與胃相連。哺乳動(dòng)物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層:黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中,肌層上1/3段為骨骼肌,下1/3為平滑肌,中段為骨骼肌和平滑肌混合組成。其中,肌纖維的排列方式分為內(nèi)環(huán)形和外縱形兩層。食管的蠕動(dòng)是由食管平滑肌收縮嚴(yán)格控制,食管還有括約肌,位于環(huán)狀軟骨水平的,稱(chēng)為食管上括約?。晃挥谑彻芟露耍徊糠衷陔跎?,穿過(guò)膈孔,另一部分在膈下的高壓帶,稱(chēng)為食管下括約肌。食管平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。
方法簡(jiǎn)介:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠食管平滑肌采用yi蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠食管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

 


小鼠食管平滑肌細(xì)胞

小鼠食管平滑肌細(xì)胞

培養(yǎng)基 FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

小鼠食管平滑肌細(xì)胞

準(zhǔn)備工作

1. 實(shí)驗(yàn)器材準(zhǔn)備:準(zhǔn)備無(wú)菌的培養(yǎng)皿、培養(yǎng)瓶、移液管、離心管、手術(shù)器械等,并進(jìn)行高壓滅菌或其他合適的消毒處理。

2. 試劑準(zhǔn)備:配制或購(gòu)買(mǎi)合適的培養(yǎng)基、消化酶(如、膠原酶等)、胎牛血清、雙抗等試劑,確保其無(wú)菌且在有效期內(nèi)。

3. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物或組織來(lái)源準(zhǔn)備:根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,選擇合適的動(dòng)物并進(jìn)行相應(yīng)的麻醉或處死,獲取所需組織;或從已有的組織樣本庫(kù)中獲取組織。

取材與處理

1. 取材:在無(wú)菌條件下,迅速取出目標(biāo)組織,盡量減少對(duì)組織的損傷,并去除多余的脂肪、結(jié)締組織等非目的組織。

2. 清洗:將取出的組織用預(yù)冷的無(wú)菌PBS沖洗數(shù)次,以去除血液和雜質(zhì)。

3. 剪切:將組織剪成約1 - 2mm3的小塊,以便后續(xù)消化。

細(xì)胞分離

1. 消化:將剪碎的組織塊放入含有適量消化酶的離心管中,在37℃恒溫?fù)u床或培養(yǎng)箱中消化一段時(shí)間。期間可輕輕搖晃離心管,使消化更均勻。

2. 終止消化:當(dāng)組織塊大部分被消化成單細(xì)胞懸液或小細(xì)胞團(tuán)時(shí),加入含血清的培養(yǎng)基終止消化。

3. 過(guò)濾與離心:用細(xì)胞篩過(guò)濾細(xì)胞懸液,去除未消化的組織碎片,然后將濾液以適當(dāng)?shù)霓D(zhuǎn)速離心,收集細(xì)胞沉淀。

細(xì)胞觀察與檢測(cè)

1. 日常觀察:每天用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞的形態(tài)、生長(zhǎng)狀態(tài)、密度等,記錄細(xì)胞的變化情況,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞污染或異常,及時(shí)采取相應(yīng)措施。
2. 細(xì)胞計(jì)數(shù)與活力檢測(cè):在需要時(shí),可采用臺(tái)盼藍(lán)染色等方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)和活力檢測(cè),以了解細(xì)胞的生長(zhǎng)情況和健康狀態(tài)。

小鼠食管平滑肌細(xì)胞

小鼠食管平滑肌細(xì)胞

人源性腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞舒尼替尼耐藥株

人卵巢癌耐藥株

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞長(zhǎng)春新堿耐藥株

FASTDIGEST CFR13I

人宮頸癌多藥耐藥細(xì)胞

FASTDIGEST CSP6I

人卵巢癌多藥耐藥細(xì)胞

FASTDIGEST EAM1104I

曲妥珠(赫塞?。┠退幍娜巳橄侔┘?xì)胞

FASTDIGEST DRAI

人肺癌細(xì)胞/5Fu耐藥株

FASTDIGEST EAM1105I

人卵巢癌細(xì)胞CoC1耐藥亞株

FASTDIGEST ECL136II

人牙周膜干細(xì)胞

FASTDIGEST ECOO109I

人膽管癌耐藥細(xì)胞株

FASTDIGEST CFR10I

人乳腺癌表柔比星耐藥細(xì)胞株

FASTDIGEST BSURI

人白血病HL-60細(xì)胞耐藥細(xì)胞株

FASTDIGEST BSP120I

胃癌耐藥細(xì)胞株

FASTDIGEST BSP119I

原代細(xì)胞

小鼠食管平滑肌細(xì)胞FASTDIGEST BPU1102I

人膀胱成纖維細(xì)胞

FASTDIGEST BGLI

48孔板,透明,平底,CellBIND表面

FASTDIGEST BCNI


小鼠食管平滑肌細(xì)胞

一、取材與分離

1. 快速操作

- 組織取材后需立即處理,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于室溫或非營(yíng)養(yǎng)環(huán)境。

- 使用無(wú)菌 PBS 或生理鹽水沖洗組織,去除血液、雜質(zhì)。

2. 消化酶選擇

- 根據(jù)組織類(lèi)型選擇消化酶,避免過(guò)度消化導(dǎo)致細(xì)胞損傷。

- 消化時(shí)間需嚴(yán)格控制(通常 10-30 分鐘),可通過(guò)顯微鏡觀察細(xì)胞解離狀態(tài)。

二、培養(yǎng)條件優(yōu)化

1. 培養(yǎng)基選擇

- 使用含血清或特定生長(zhǎng)因子的培養(yǎng)基(如 DMEM、RPMI 1640 等),部分細(xì)胞需添加胰島素、EGF 等。

- 避免頻繁更換培養(yǎng)基品牌或批次,減少細(xì)胞適應(yīng)壓力。

2. 貼壁與傳代

- 原代細(xì)胞貼壁能力較弱,可能需要包被培養(yǎng)皿(如膠原蛋白、多聚賴(lài)氨酸)。

- 傳代時(shí)密度建議控制在 70%-80%,過(guò)度匯合會(huì)導(dǎo)致接觸抑制和分化。

三、污染控制

1. 無(wú)菌操作

- 全程在超凈臺(tái)操作,使用一次性耗材,避免交叉污染。

- 培養(yǎng)基中可添加雙抗,但長(zhǎng)期使用可能影響細(xì)胞活性。

2. 支原體檢測(cè)

- 定期檢測(cè)支原體污染(如 PCR 法),污染后需及時(shí)丟棄細(xì)胞。

四、狀態(tài)監(jiān)控

1. 日常觀察

- 每天檢查細(xì)胞形態(tài)、密度及培養(yǎng)基顏色,及時(shí)更換培養(yǎng)基(通常每 2-3 天換液一次)。

- 異常形態(tài)(如細(xì)胞變圓、碎片增多)可能提示污染或營(yíng)養(yǎng)不足。

2. 傳代與凍存

- 原代細(xì)胞分裂次數(shù)有限(一般 5-10 代),需及時(shí)凍存早期代次細(xì)胞。

- 凍存液建議使用 DMSO+血清(或?qū)S脙龃媾囵B(yǎng)基),梯度降溫后液氮保存。



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